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比赛由南美洲足球联合会的10个成员国巴西、阿根廷、乌拉圭、巴拉圭、智利、哥伦比亚、厄瓜多尔、秘鲁、委内东方901足球网瑞拉、玻利维亚，再加上中北美州的墨西哥国内联赛球队参加，2005年之后参赛名额的分配为巴西和阿根廷各有5个，其它9个国家皆有3个，另外卫冕冠军不占用所在国家名额，他们将直接晋级32强小组赛。

北京时间2014年10月15日凌晨举行的2016年欧锦赛预选赛塞尔维亚队对阿尔巴尼亚队的比赛因现场意外爆发政治冲突而被迫叫停。两方球员为争夺这面旗帜爆发了冲突比赛进行过程中，一架远程操控的无人机突然闯入现场，该飞机还携带了一面科索沃（领土争东方901足球网议地区）的旗帜，并写有挑衅标语。无人机飞入赛场后，塞尔维亚前锋亚历山大·米特洛维奇纵身跃起，扯下这面旗帜，并与试图保护旗帜的阿尔巴尼亚球员发生了冲突，随后比赛现场就陷入了混乱。

智利（Chile）在这届世界杯上先后使用过两个官方用球，其中一款与上届世界杯的“Telstar”十分类似。另一款“Chile”则恢复成全白色足球，因为该设计与1962年智利世界杯东方901足球网时曾使用过的一款全白色足球酷似，所以得名于此。